应用随机肽库筛选展示河豚毒素模拟表位噬菌体
【作者】
张林
;
江涛
;
计融
【关键词】
河豚毒素
噬菌体展示肽库
【摘要】目的利用噬菌体随机肽库筛选展示河豚毒素(TTX)模拟抗原表位的噬菌体,并以其替代毒素建立免疫学检测方法。方法以抗TTX单克隆抗体为靶分子,从以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ表面的随机七肽库中进行生物亲和淘选,用ELISA法鉴定阳性克隆。结果通过4轮淘选,获得了7株能与抗TTX单克隆抗体特异性结合的噬菌体,采用间接竞争ELISA,筛选到3株能抑制TTX的阳性克隆。其中以4号噬菌体建立的免疫检测方法,线性范围为1~20ng/ml(TTX毒素浓度),R2=0.9947,检测下限为1ng/ml。结论从噬菌体七肽库筛选到了展示TTX模拟抗原表位的噬菌体,淘选出来的噬菌体粒子可作为毒素的替代品用于免疫学检测。
上一篇:食品致敏性评价啮齿类动物模型研究——C3H/HeJ小鼠动物模型
下一篇:碘缺乏和甲状腺功能减退对大鼠仔鼠海马ERK1/2表达的影响