蛋白质芯片检测可溶性转铁蛋白受体条件的优化研究
【作者】
殷继永
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霍军生
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孙静
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黄建
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李文仙
【关键词】
蛋白芯片
可溶性转铁蛋白受
【摘要】目的优化蛋白芯片检测可溶性转铁蛋白受体(sTfR)的技术条件。方法用芯片点样仪将血清铁蛋白的一种抗体点样于PSG芯片上,用其另一种抗体做为检测抗体,以Cy3标记的羊抗做为二抗进行检测。以双抗夹心法对sTfR抗原进行检测。结果以sTfR单克隆鼠抗为固定探针,选择接触式点样进行芯片点样,预点样在40以后可出现较好的点样一致性;sTfR的固定探针的浓度选择0.25mg/ml,其检测抗体的浓度为0.18μg/ml;3%脱脂乳粉和GE公司的羊抗兔IgG被优选为封闭剂与第二抗体。sTfR检测下限与生物检测限分别为0.253ng/ml和0.78ng/ml;建立了对sTfR具有最佳相关系数的回归方程(r=0.99699)与标准曲线。结论该研究优化了用于sTfR检测的蛋白芯片检测条件,从而建立了定量检测sTfR的蛋白芯片平台。
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