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苯并[a]芘对体外培养大鼠皮层神经元HSP70表达的影响

【作者】 许国耀 ; 郑金平

【关键词】 苯并 芘 皮层神经元 热休

摘要】目的研究苯并[a]芘(B[a]P)对体外培养大鼠皮层神经元热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法分离培养SD大鼠皮层神经元,用0、0.1、0.5、1、5和10μmol/L浓度的B[a]P染毒24h观察剂量-效应关系;用0、0.5和5μmol/L浓度的B[a]P染毒24、48和72h观察时效关系。培养液中均添加体积分数为3%的S9混合液。MTT法检测神经元活性,Western blot法检测神经元HSP70的表达水平,荧光免疫组化法观察神经元HSP70表达定位情况。结果 B[a]P染毒24h后,0.1μmol/L组神经元HSP70表达水平与对照组(0μmol/L组)相比差异无统计学意义(P〉0.05),而0.5~10μmol/L组神经元HSP70表达水平则逐渐下降,与0.1μmol/L组相比,差异均具有统计学意义(P〈0.05),其中10μmol/L组与对照组相比差异具有统计学意义(P〈0.05)。0、0.5、5μmol/L B[a]P分别染毒24、48、72h后,0.5、5μmol/L组各时间点神经元的HSP70表达水平均显著低于相应对照组(P〈0.05),且均有随着时间延长表达水平降低的趋势,其中72h组与24h组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。免疫组化结果显示,对照组HSP70仅在细胞浆中表达,0.1μmol/L组荧光表达增强,细胞浆和核中均有表达。随着剂量增大,核内表达逐渐增多,荧光强度逐渐减弱。结论较大剂量(0.5~10μmol/L)的B[a]P代谢产物可抑制大鼠皮层神经元HSP70表达,且存在剂量-效应关系和时效关系。随着B[a]P剂量增大,HSP70逐渐向细胞核内移位。

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