【摘要】目的制备能够识别多种β-内酰胺酶结构的广谱特异性抗体,并初步建立用于检测牛奶中违法添加β-内酰胺酶的间接竞争酶联免疫分析方法（ELISA）。方法以混合β-内酰胺酶作为全抗原,免疫动物获得β-内酰胺酶广谱特异性多克隆抗体,分离纯化后进行详细表征,确定最佳使用条件,并开发适用于牛奶样品中β-内酰胺酶检测的免疫分析方法。结果获得了能够识别多种β-内酰胺酶的多克隆抗体,血清中抗体浓度达到17.9～18.9mg/ml,抗体重链和轻链分子量分别为55和25kD,总分子量为160kD,亲和常数为3.6×108L/mol,以该抗体为基础建立了检测β-内酰胺酶的间接竞争ELISA法,方法检出限为0.2ng/ml,线性范围0.2～200ng/ml,平均回收率在80%～115%之间,相对标准偏差小于20%。结论获得了β-内酰胺酶多克隆抗体,并建立了间接竞争ELISA方法测定牛奶中β-内酰胺酶含量。