【摘要】目的优化甲型流感病毒在MDCK细胞上的培养条件，提高甲型流感病毒的分离率和监测效果。方法将三种甲型流感病毒液（甲型H1N1、季节性H1N1、季节性H3N2）分别接种于MDCK细胞，通过比较不同的病毒接种量（25、50、75、100、125和150μl／cm2）、不同的TPCK一胰酶添加浓度（1．0、1．5、2．0、2．5、3．0和3．5txg／m1）以及不同的MDCK细胞增毒代次（连续盲传四代），对三种甲型流感病毒易感性的影响，确定其最佳分离效果。结果三种甲型流感病毒：甲型H1N1、季节性H1N1、季节性H3N2的最佳病毒接种量分别为：100、75和75μl／cm2；胰酶最佳使用浓度分别为2．5、2．0和2．0μg／ml；最适宜的细胞增毒传代次数为：一代、二代、二代；低代次的MDCK细胞对甲型HINl流感病毒的易感性高于季节性HlNl和季节性H3N2；甲型H1Nl流感在培养后病毒的HA滴度低于季节性H1N1与季节性H3N2。结论甲型H1N1流感病毒在MDCK细胞上的分离效果低于季节性H1N1与季节性H3N2；季节性H1Nl流感病毒和季节性H3N2流感病毒的分离条件基本相同。