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重组诺如病毒GII 4型衣壳蛋白的表达、纯化及鉴定
【作者】 王佳慧 ; 韩春卉 ; 李楠 ; 徐进 ; 李凤琴 ; 江涛
【关键词】 重组蛋白 诺如病毒 杆状病毒表达系统
【摘要】目的通过基因重组方式获取高浓度重组诺如病毒GⅡ4型衣壳蛋白。方法将诺如病毒GII 4型衣壳蛋白基因片段插入pHT A载体中,测序鉴定正确后,将重组质粒转化到MAX Efficiency DH10Bac^TM感受态细胞,表达目的蛋白。重组蛋白用Ni-NTA His蛋白亲和柱纯化,用诺如病毒检测试剂盒进行鉴定。结果 SDSPAGE结果表明成功表达了分子量约为60 kD的重组蛋白,经诺如病毒检测试剂盒鉴定,表达产物为重组诺如病毒衣壳蛋白,并且具有较好的免疫原性。结论构建了诺如病毒GII 4型衣壳蛋白表达载体,并获得重组诺如病毒GII 4型衣壳蛋白。
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