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蛋白芯片检测牛乳β-乳球蛋白条件的优化
【作者】 马欣欣 殷继永 孙静 黄建 朴玮 李瑾 陈頔 苑晓琳 霍军生 中国疾病预防控制中心营养与健康所 北京100050
【关键词】 蛋白芯片 β-乳球蛋白 快速检测
【摘要】目的优化蛋白芯片检测β-乳球蛋白（β-Lg）的技术条件。方法用芯片点样仪将β-乳球蛋白的一种抗体点样于三维基片上,用其另一种抗体作为检测抗体,以Cy3标记的羊抗作为二抗进行检测。以双抗夹心法对β-Lg抗原进行检测。结果β-Lg单克隆鼠抗66#被确定为点样探针,选择接触式点样进行芯片点样,点样数在42～92点之间可出现较好的点样一致性;β-Lg固定探针的浓度选择0.5 mg/mL,其检测抗体的稀释度为1∶2000;1%无蛋白封闭液被优选为封闭剂;β-Lg检测下限与生物检测限分别为17.54和55.31 ng/mL。根据β-Lg的S型曲线确定了其线性范围并建立了对β-Lg具有最佳决定系数（R2=0.9993）的回归方程与标准曲线。结论本研究优化了牛乳中β-Lg检测的蛋白芯片检测条件,建立了定量检测牛乳β-Lg的蛋白芯片平台。
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