同位素稀释高效液相色谱串联质谱测定尿中肌酐
【作者】
张续
杜鹏
杨艳伟
林少彬
胡小键
【关键词】
肌酐
尿
同位素稀释
高效液相色谱串联质谱
【摘要】目的 建立同位素稀释高效液相色谱串联质谱测定尿中肌酐的分析方法.方法 尿液样品直接用甲醇-水溶液(7∶3,V/V)稀释800倍,经0.45 μm滤膜过滤净化,使用Atlantis Hilic Silica(2.1 mm×150 mm,3μm)色谱柱分离样品,甲醇-水溶液(7∶3,V/V)为流动相进行等度洗脱,电喷雾离子源正离子模式(ESI+)和多反应监测模式(MRM)采集信号,肌酐同位素内标进行定量,利用尿肌酐标准参考物质评价方法准确性,并对测定方法进行不确定度评价.结果 肌酐标准曲线在0.31~5.00 μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.999 9;尿液中肌酐的定性检出限(LOD)为0.003 mg/mL,定量检出限(LOQ)为0.011 mg/mL;实际尿液样品在两个浓度水平的加标回收率分别为93.9% ~ 104.0%和90.6% ~ 93.8%,相对标准偏差为4.4% ~7.6%和4.6%~7.8%(n=6);尿肌酐标准参考物质定量结果在参考限值范围内;测定结果的不确定度主要源于标准曲线、回收率和仪器允差.结论 本方法可用于测定人尿液中肌酐浓度,其测定值准确可靠,灵敏度高,稳定性好.
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