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多重荧光PCR技术快速鉴定常见15种沙门菌血清型
【作者】 左乐 姜伊祥 万敏 江敏 石晓路 李迎慧 邱亚群 林一曼 扈庆华
【关键词】 沙门菌血清型 多重荧光PCR
【摘要】目的建立快速高效的多重荧光PCR方法,用于鉴定常见15种沙门菌血清型。方法通过沙门菌基因组比对,发现12个膜蛋白STM4497基因可有效区分常见15种沙门菌血清型,将这12个基因分别标识为A^L基因,并设计引物探针用于建立常见15种沙门菌血清型分子鉴定方法,评估其最低检出限、特异度、可重复性等指标。并以传统血清学方法作对照,采用多重荧光PCR法对206株沙门菌进行鉴定,评估新建方法的一致性。结果多重荧光PCR法最低检出限1.1×10^-3~1.2×10^-3 ng/μL,特异度100%,相对标准偏差均<2.97%。与传统血清学方法比较,新建方法的Kappa值为0.92~1.00。结论建立的基于多重荧光PCR鉴定常见15种沙门菌血清型的方法快速、准确、特异性强。
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