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大鼠胚胎脑新皮质神经干细胞的体外分离培养方法研究
【作者】 王霞 ; 韦霄 ; 郑唯韡 ; 张皓 ; 陈涵一 ; 田大军 ; 蒋颂辉 ; 屈卫东
【关键词】 神经干细胞 大鼠胚胎 新皮
【摘要】目的建立大鼠胚胎脑新皮质神经干细胞的体外分离培养方法。方法从孕14天SD大鼠胚胎脑分离新皮质,通过机械吹打改善细胞分散状态、优化无血清培养基条件,从而改进神经干细胞的培养方法。利用神经干细胞标志蛋白（nestin和SOX2）、增殖和克隆成球能力以及多向分化能力测试三方面对神经干细胞进行鉴定。结果以该法培养的神经干细胞nestin蛋白呈强阳性表达,SOX2阳性表达率达99%以上,BrdU掺入阳性,培养3天后细胞量为接种量的10.55倍,6日克隆成球率为（33.00±4.40）%。经相应特异性标志蛋白检测证实神经干细胞经诱导分化后可形成神经元（MAP2）、星形胶质细胞（GFAP）和少突胶质细胞（O4）。结论获得的神经干细胞纯度和细胞产出率高,具有强自我更新和多向分化能力。
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