激动线粒体乙醛脱氢酶2可降低高糖诱导的A549细胞炎性小体生成

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【作者】王文连 [1] 曹瑞平 [2] 林欣 [1] 刘贤莉 [3] 徐洪宝 [3] 黄礼年 [1] 胡俊锋 [1]

【关键词】 A549细胞线粒体乙醛脱氢酶2 炎性小体高糖

【摘要】目的探讨激动线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对高糖诱导的A549细胞炎性小体生成的影响.方法 25 mmol/L高糖完全培养基体外培养肺泡上皮A549细胞,实验分为4组:对照组,ALDH2激动剂20 μmol/LAlda-1组,ALDH2阻断剂60 μmol/L Daidzin组,20 μmol/L Alda-1 +60 μmol/L Daidzin 组.干预处理24 h后,四甲基噻唑盐(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测细胞增殖活力,二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)荧光染色检测细胞活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测ALDH2及炎性小体主要成员核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、合半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1 (cysteinyl aspartate specific protease-1,caspase-1)蛋白的表达.结果与对照组相比,Alda-1特异性激动ALDH2后,细胞增殖活力无明显变化,细胞ROS水平和细胞迁移率均明显降低(P＜0.05),ALDH2蛋白表达增加(P＜0.05),炎性小体主要成员NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显降低(P＜0.05);Daidzin特异性阻断ALDH2后,细胞增殖活力、细胞ROS水平、细胞迁移率、ALDH2蛋白和ASC蛋白表达无明显变化,NLRP3蛋白表达明显升高(P＜0.05),caspase-1蛋白表达明显降低(P＜0.05).与Alda-1组相比,Alda-1+Daidzin组细胞增殖活力及ROS水平无明显变化,细胞迁移率明显增高(P＜0.05),ALDH2蛋白表达降低(P＜0.05),NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达明显增高(P＜0.05).结论提高ALDH2在肺泡上皮A549细胞中的表达可减轻高糖诱导的细胞炎症反应,可能是通过降低细胞ROS水平、降低炎性小体的表达来实现.

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