人参皂苷F2对过氧化氢诱导细胞损伤的保护作用

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【作者】刘迪 [1] 张聪 [2] 孙宏宇 [1] 时文艳 [1] 孔繁利 [2] 冯宪敏 [1]

【关键词】人参皂苷F2 氧化应激核因子E2相关因子2 信号通路

【摘要】目的研究人参皂苷F2对人胚肾293(HEK-293)细胞氧化应激损伤的保护作用.方法以0.4 mmol/L过氧化氢(H2O2)诱导HEK-293细胞氧化应激,1.25、5和20 μmol/L人参皂苷F2预处理,MTS法检测细胞活力;DCFH-DA荧光探针考察细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;试剂盒检测丙二醛(malondialchehyche,MDA)水平和抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;蛋白质印迹法(Western blot)和qRT-PCR检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/抑制蛋白Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)信号的蛋白和mRNA表达量.结果 1.25、5和20 μmol/L人参皂苷F2处理正常HEK-293细胞后对细胞无毒性或促增殖作用;人参皂苷F2预处理氧化应激细胞后,细胞活力显著高于损伤组,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05);氧化损伤组的DCF荧光较对照组相比显著增强(P＜0.05),人参皂苷F2预处理后细胞ROS相对量呈浓度依赖性降低,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05);人参皂苷F2预处理后细胞MDA水平呈浓度依赖性降低,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05),SOD和GSH-Px活性显著高于损伤组(P＜0.05),5和20 μmol/L人参皂苷F2能显著提高CAT活性(P＜0.05);人参皂苷F2处理后,Nrf2的mRNA和蛋白表达量均显著升高(P＜0.05),Keap1的mRNA和蛋白表达量显著低于损伤组(P＜0.05).结论人参皂苷F2具有细胞保护作用,可降低HEK-293细胞ROS和MDA水平,提高抗氧化酶活性,其作用机制可能是通过调节Nrf2/Keap1信号通路以抵抗过氧化氢导致的细胞氧化应激损伤.

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